酒石酸亚铁法

酒石酸亚铁法是一种常用的还原糖分析方法，以下是该方法的详细说明：

1. 试剂准备：

a. 酒石酸亚铁(FeSO4·7H2O)溶液：称取1.246 g酒石酸亚铁，加入去离子水中稀释至100 mL。

b. 酸性硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶液：称取0.315 g酸性硫酸铜，加入去离子水中稀释至100 mL。

c. 菲罗啉(Phenanthroline)溶液：称取0.1 g菲罗啉，加入95%乙醇中稀释至100 mL。

2. 样品制备：将待测样品称取适量，加入10 mL氢氧化钠(NaOH)溶液中，加热至沸腾，并保持沸腾状态5分钟。然后降温至室温，加入0.5 mL无水乙醇，振荡混合均匀。最后用去离子水定容至50 mL。

3. 测定步骤：

a. 分别取三个试管，加入2 mL制样液和2 mL酸性硫酸铜溶液，并在沸水中加热5分钟，使其还原。

b. 然后立即降温至室温，加入2 mL菲罗啉溶液，并摇匀混合。

c. 用去离子水定容至10 mL，用紫外可见光分光光度计测定吸光度值(A)。

d. 按上述方法分别处理葡萄糖标准溶液，并用其制成标准曲线。

4. 计算：根据标准曲线计算待测样品中还原糖的含量。如果样品中还存在其他有色物质，应进行空白试验并相应修正结果。